Проект КП-06-Н96/3 – Работна програма
Работната програма съдържа пет пакета. Изследванията ни ще бъдат насочени към изясняване на устойчивостта на възкръсващите и културните растения към едновременно действие на абиотичен и биотичен стрес и дали възниква кръстосана толерантност между устойчивостта към засушаване и устойчивостта към гъбни патогени.
Работен пакет 1. Анализ на чувствителността на растенията към патогенни гъби.
Дейност 1.1. Определяне на чувствителността/резистентността на of H. rhodopensis and S. lycоpersicum към патогенни гъби след in vitro инокулационни анализи с помощта на макро- и микроскопски методи. Очакван резултат: Оценка за степента на заразяване или развитие на патологичен процес при двете групи растения в зависимост от особеностите на гъбния патоген и видова идентификация.
Дейност 1.2. Чувствителност/резистентност на H. rhodopensis и S. lycopersicum към гъбни инфекции в зависимост от водния статус на растенията (напълно хидратирано състояние, по време на умерено засушаване, както и след рехидратиране). Очакван резултат: Оценка за степента на заразяване или развитие на патологичен процес при контролни, засушени и рехидратирани растения от двата вида.
Работен пакет 2. Физиологичен отговор на комбинирано действие на засушаване и гъбни патогени, и промени в съдържанието на основни фотосинтетични белтъци.
Дейност 2.1. Оценка на интегритета на мембраните и NDVI индекса на растенията. Очакван резултат: Ще се получи информация за състоянието на мембраните и общото физиологично състояние на растенията при комбинираното действие на засушаване и гъбни патогени.
Дейност 2.2. Промени в устичната проводимост и фотохимичната активност на ФС1 и ФС2.
Очакван резултат: Ще се получи информация как едновременното действие на засушаване и патогенни гъби повлиява фотосинтетичната активност при двете изследвани растения.
Дейност 2.3. Промени в съдържанието на основните фотосинтетични протеини. Очакван резултат: Да се оценят промените във фотосинтетичните белтъци на ФС1, ФС2, LHC и цитохром b6f комплекса при едновременното действие на засушаване и патогенни гъби при H. rhodopensis и S. lycopersicum.
Дейност 2.4. Промени в съдържанието на хлорофил и каротеноиди в стресови условия. Резултат: Да се оцени дали комбинираното действие на засушаване и гъбни патогени води до намаляване на количеството на хлорофила в листата и каква е ролята на каротеноидите.
Работен пакет 3. Ролята на антиоксидантната система и стрес-индуцираните белтъци и метаболити в отговор на комбинирано действие на засушаване и гъбни патогени.
Дейност 3.1. Промени в съдържанието на някои неензимни антиоксиданти (аскорбат, флавоноиди) и активността на антиоксидантните ензими (каталаза, супероксид дисмутаза, аскорбат пероксидаза). Очакван резултат: Да се получи информация за ролята на неензимните и ензимните антиоксиданти при комбинирано действие на засушаване и гъбни патогени.
Дейност 3.2. Анализ на експресията на дехидрини, ELIP и sHSP протеини и тяхната роля при едновременно действие на абиотичен и биотичен стрес. Очакван резултат: Да се изясни ролята на стрес-индуцираните белтъци дехидрини, ELIP и sHSP белтъци при едновременното действие на засушаване и патогенни гъби при H. rhodopensis и S. lycopersicum.
Дейност 3.3. Роля на разтворимите захари и скорбялата в отговор на комбиниран абиотичен и биотичен стрес. Очакван резултат: Да се оценят промените в количеството на разтворимите захари и скорбялата и да се изясни тяхната роля при едновременното действие на засушаване и патогенни гъби при H. rhodopensis и S. lycopersicum.
Работен пакет 4. Транскрипционен и ДНК репаративен анализ при комбинирано действие на засушаване и гъбни инфекции.
Дейност 4.1. Транскрипционна активност на гени, участващи във фотосинтезата, антиоксидантния и имунния защитен отговор на растенията. Очакван резултат: Да се получат данни за активността на гените, свързани с фотосинтезата, геномния интегритет, отговора към оксидативен и биотичен стрес.
Дейност 4.2. ДНК репаративен анализ. Очакван резултат: Да се получат данни за степента на увреждане на ДНК в условия на комбиниран абиотичен и биотичен стрес.
Работен пакет 5. Анализ на емисиите на растителни хормони и летливи органични съединения (BVOC) по време на засушаване и гъбни инфекции.
Дейност 5.1. Количествен анализ на динамичните промени в специфични растителни хормони (абсцисинова киселина, ABA; жасмонова киселина, JA; метил жасмонат, MeJA; метил салицилат, MeSA) в отговор на патогенна инфекция и засушаване. Очакван резултат: Ще бъде изяснена ролята на някои растителни хормони в отговора към засушаване и гъбни патогени.
Дейност 5.2. Качествен и количествен анализ на емисиите на летливи органични съединения (BVOCs) от листата и тяхната времева динамика в отговор на стрес чрез газова хроматография-масспектрометрия (GC-MS) и масспектрометрия с протон-трансферна реакция (PTR-MS). Очакван резултат: Ще бъдат изяснени промените във вида и количеството на отделяните съединения, показващи реакцията на растението във времето.
